AEEA-AEEA Хидрофилен линкер

Агрегацията на ADC и бързото изчистване са основните пречки, водещи до висока имуногенност, ниска ефикасност и неуспешна партида. Въвеждането на хидрофилни линкери (съдържащи PEG единици като AEEA-AEEA) е ефективна стратегия за справяне с тези два проблема.
The mechanism for reducing aggregation: The driving force for ADC aggregation is mainly the mutual attraction between hydrophobic drug molecules. When DAR>4, multiple drug molecules concentrate on the surface of the antibody, forming a "hydrophobic plaque". Hydrophilic PEG linkers, such as AEEA-AEEA, prevent aggregation through the following methods: ① Hydration layer repulsion: PEG chains bind a large number of water molecules, and each EO unit binds 2-3 H ₂ O, forming a hydration layer with a thickness of about 0.5-1 nm/unit. The total thickness of the hydration layer contributed by two AEEA units (four EO) is about 2 nm, which is sufficient to form an effective barrier between drug molecules (repulsive energy~3-5 kT, far greater than hydrophobic attraction~1-2 kT). ② Conformal entropy repulsion: The flexible conformation of PEG chains reduces their entropy during compression, generating entropy elastic repulsion and further resisting aggregation. The experiment showed that using AEEA-AEEA ADC (DAR=6) at a concentration of 5 mg/mL, the aggregation rate (SEC-HPLC detection of HMW aggregates) was less than 3%; The control without PEG linker (DAR=4) had aggregates>15%.
Механизмът на забавяне на клирънса: рецептори за клирънс върху клетки на Купфер и синусоидални ендотелни клетки в черния дроб, като специфични домени на антитела за разпознаване на MR{0}}B1 на рецептора за очистване и манозния рецептор. Зареждането с хидрофобно лекарство върху повърхността на антителата разкрива хидрофобните региони, повишавайки афинитета за изчистване на рецепторите. Хидрофилните PEG вериги на AEEA-AEEA могат ефективно да „маскират“ тези хидрофобни области. Изследванията показват, че ADC, използващ PEG линкери, намалява усвояването на черния дроб с 50-60% в сравнение с контролната група без PEG и скоростта на плазмения клирънс намалява от 12 mL/h/kg на 6 mL/h/kg. Полу{15}}животът на цикъла е удължен от 3 дни на 7 дни в миши модел. В допълнение, хидрофилността също така намалява риска от свързване с анти PEG антитела. Когато дължината на PEG е умерена, имуногенността на AEEA димера е много по-ниска от тази на дълговерижния PEG като PEG2000.
Синергия на формулата: Хидрофилните линкери също опростяват разработването на формула -, като поддържат стабилност без необходимост от високи концентрации на повърхностно активни вещества. В лиофилизирани-състави, агрегацията на ADC, съдържаща AEEA-AEEA след разтваряне е по-малко от 1%, което далеч надвишава стандарта във фармакопеята (<5%). Therefore, hydrophilic PEG linkers have become a "standard" design element for ADC stability and long cycling.